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產品簡介
小麥胚芽凝集素，AF647標記（下文簡稱“AF647 WAG"）， 是一種與N-乙酰-D-葡萄糖胺和唾液酸結合的凝集素，可能是明亮和綠色熒光中最亮的WGA綴合物。它是目前研究多、應用廣泛的一類凝集素。
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| 品牌 | Life-iLab/李記生物 | 貨號 | AC15L016 |
|---|---|---|---|
| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,綜合 |
產品描述
小麥胚芽凝集素， AF647標記（下文簡稱“AF647 WAG"）， 是一種與N-乙酰-D-葡萄糖胺和唾液酸結合的凝集素，可能是明亮和綠色熒光中最亮的WGA綴合物。它是目前研究多、應用廣泛的一類凝集素。由于WGA與糖綴合物結合，其衍生物和綴合物被廣泛用于標記細胞膜和纖維化瘢痕組織，用于熒光成像和分析。WGA的糖結合特異性與β-1,4-GlcNAc-連接殘基的序列，即幾丁質酶有關。每個單體包含兩個相同的非相互作用的結合位點，它們與3或4β-1,4-GlcNAc單元互補。在所檢測的單糖中，只有GlcNAc與WGA結合。甘露聚糖不結合，而GalNAc只能弱結合。WGA與含有Galβ（1--4）GlcNAcβ（1--3）重復序列（即聚乳糖胺型聚糖）的大寡糖中的內部GlcNAc殘基具有高親和力結合。N-乙酰神經氨酸只參與與WGA的低親和力相互作用。WGA顯示了復雜的糖類特異性模式，可用于復雜碳水化合物的結構分析。
技術資料
Ex (nm)： | 656 | Em (nm)： | 670 |
分子量： | N/A | 溶劑： | Water |
訂購信息
產品名稱 | 貨號 | 規格 |
小麥胚芽凝集素，AF647標記 | AC15L016 | 1mg |
運輸與保存
藍冰運輸。-20℃避光防潮保存，有效期12個月。
適用儀器
熒光顯微鏡 | |
激發： | Cy5濾波片 |
發射： | Cy5濾波片 |
推薦孔板： | 黑色透明 |
使用方法
溶液配制
1. AF647 WAG儲備溶液（200X）配制
將 500 µL ddH2O 添加到粉末小瓶中，制成 2 mg/mL 的儲備溶液。【注】：重新配制的儲備溶液可在 4℃ 下短期儲存，或在 -20℃ 下長期儲存。
2. AF647 WAG工作溶液（1X）配制
將 5 μL 200X WGA 儲備溶液添加到 1 mL HHBS 緩沖液中。【注】：不同細胞系的優化染色濃度可能不同。活細胞的推薦起始濃度為 5-10 µg/mL。
操作步驟
1. 活細胞染色
(1) 用 HHBS 緩沖液清洗細胞兩次。
(2) 添加 100 µL AF647 WAG 工作溶液。
(3) 將細胞與AF647 WAG 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 min。
(4) 用 HHBS 緩沖液清洗細胞兩次。
(5) 使用 FITC 濾光片組在熒光顯微鏡上成像細胞。
2. 固定細胞染色
(1) 在PBS中使用4％的甲醛固定細胞。【注】：對于固定細胞膜染色，建議在沒有透化步驟的情況下進行染色。固定后透化步驟會導致細胞內區室染色，如高爾基體和內質網 (ER) 結構染色。
(2) 添加 100 µL AF647 WAG 工作溶液。
(3) 在室溫下用AF647 WAG 工作溶液孵育細胞 10-30 min。
(4) 用 HHBS 緩沖液清洗細胞兩次。
(5) 使用 FITC 濾光片組在熒光顯微鏡上成像細胞。
圖示
圖 1. 使用AF647 WAG 以 5 µg/mL的濃度在活細胞（Hela細胞） 染色 30 min，然后用 Hoechst 33342（Cat# AC12L021）染色。最后使用帶Cy5和DAPI 濾光片組的熒光顯微鏡成像。
注意事項
1. 本產品僅限于科學實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領域。
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