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當前位置:首頁產品中心PCR&q-PCRPCRAN11L818/AN11L8192 x Taq PCR Master Mix

2 x Taq PCR Master Mix

產品簡介

2 x Taq PCR Master Mix含有 Loading Dye,PCR 產物需經過切膠回收后才可充分去除 Loading Dye。

產品型號:AN11L818/AN11L819
更新時間:2025-06-11
廠商性質:生產廠家
訪問量:3823
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品牌其他品牌貨號AN11L818/AN11L819
規格2 * 1mL供貨周期現貨
主要用途主要用于基因組 DNA 靶序列和 RNA 反轉錄后 cDNA 靶序列的定性檢測。應用領域生物產業

2 x Taq PCR Master Mix

產品描述

2 x Taq PCR Master Mix 是PCR 反應預混液,其中包含Taq DNA Polymerase、dNTPs、反應緩沖液、loading Dye 等成分,使用時只需取適量本產品,加入模板和引物,并加入 ddH2O 補足體積,使反應體系濃度為 1× 即可進行 PCR 反應。本產品最長可擴增 5kb DNA片段,具有良好的擴增特異性和模板兼容性, PCR 產物 3' 端帶突出 A 堿基,純化后可直接用于 T/A 克隆。

本產品中包含兩種染料,PCR反應完成后無需額外添加 loading buffer,可以直接進行電泳,且電泳過程中會出現兩個指示條帶。該染料不影響 PCR 擴增效率,但對于需要對 PCR 產物進行吸光度、熒光等光學分析的實驗,建議在分析前對 PCR 產物進行純化,或使用無染料的PCR預混液。


訂購信息

產品名稱

貨號

規格

2 x  Taq PCR Master Mix

AN11L818

2*1mL

2 x  Taq PCR Master Mix

AN11L819

5*1mL


運輸與保存

藍冰運輸。-20℃保存,有效期24個月。


使用方法

1.       常規 PCR 反應體系

組分

20 μL體系

50 μL體系

終濃度

2 x  Taq PCR Master Mix

10 μL

25 μL

1 x

正向引物(10 μM)(1)

0.4-0.8 μL

1-2 μL

0.2-0.4 μM

反向引物(10 μM)(1)

0.4-0.8 μL

1-2 μL

0.2-0.4 μM

DNA 模板(2)

X μL

X μL

-

ddH2O

To 20 μL

To 50 μL

-

(1)       引物推薦終濃度為 0.2~0.4 μM,效果不佳時可以在 0.1~1 μM 濃度范圍內進行調整;  

(2)       不同模板最佳反應濃度有所不同,以 50 μL 體系為例:模板為基因組 DNA 時,一般推薦的使用量為 10~400 ng;當模板為質粒或病毒 DNA 時,一般推薦的使用量為 10 pg~20 ng。

2.       常規 PCR 反應程序

步驟

溫度

時間

預變性(1)

95℃

3~5 min

變性

95℃

30 sec

退火

53~65℃

30 sec

延伸(2)

72℃

30~60 sec/kb

 

30~35 Cycles

終延伸

72℃

5min







(1)       該預變性條件適合絕大多數擴增反應, 對于一些復雜模板, 例如:菌液、菌落(尤其是酵母)的PCR 擴增,預變性時間可適當延長至 10 min,以提高預變性效果;

(2)       關于延伸速率,當目的片段長度不超過 3 kb 時,推薦使用 30 sec/ kb;當目的片段長度大于 3 kb 時,推薦使用 60 sec/kb。

 

3.       凝膠濃度對應的染料遷移距離

瓊脂糖凝膠濃度

金色條帶

藍色條帶

0.8%

~80 bp

4000 bp

1.0%

~40 bp

2000 bp

1.5%

~20 bp

1500 bp

2.0%

<10 bp

1200 bp

2.5%

<10 bp

1200 bp

3.0%

<10 bp

1200 bp

注:染料會影響吸光度。

 

注意事項

1.   本產品僅限于科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領域。

2.    本產品在短期 -20℃ 儲存時不會凝固,可以隨取隨用,如遇儲存溫度波動,體系結冰為正常現象不影響使用。

3.   建議將所有的反應組分在冰上配制,最后加入2 x  Taq PCR Master Mix。

4.  使用基因組模板進行較長片段擴增需要使用高質量純化的DNA模板,可以提高 PCR 成功率。

5.  本產品擴增產物可用于 T/A 克隆。由于本產品含有 Loading Dye,PCR 產物需經過切膠回收后才可充分去除 Loading Dye。

 

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