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產品簡介
SmartCell線粒體染色試劑盒Green是一種存在于大多數真核細胞中的兩層膜結構的細胞器，是細胞中的“能量工廠"（cellular power plants）“,生產了細胞所需的大部分ATP，除了為細胞提供能量外，還涉及諸如細胞分化、細胞信息傳遞和細胞凋亡等過程，并擁有調控細胞生長和細胞周期的能力。
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| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | AC14L013 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 500 assays | 供貨周期 | 現貨 |
| 主要用途 | Smart Cell染色試劑盒是Life-iLab公司專門研發(fā)的一類熒光成像工具 | 應用領域 | 生物產業(yè) |
產品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 保存 | 價格(元) |
SmartCell線粒體染色試劑盒Green | AC14L013 | 500 assays | -20℃ | 2980 |
產品描述
線粒體(mitochondrion)是一種存在于大多數真核細胞中的兩層膜結構的細胞器，是細胞中的“能量工廠"(cellular power plants)",生產了細胞所需的大部分ATP，除了為細胞提供能量外，還涉及諸如細胞分化、細胞信息傳遞和細胞凋亡等過程，并擁有調控細胞生長和細胞周期的能力。已有文獻報道，線粒體還與線粒體失調癥、心臟功能障礙、衰老等人類疾病有關。盡管大部分細胞遺傳物質DNA在細胞核內，但線粒體擁有獨立的基因組，呈現母性遺傳。基于以上特點，線粒體是生物、生命科技領域的研究熱點。
Smart Cell染色試劑盒是Life-iLab公司專門研發(fā)的一類熒光成像工具，試劑盒設計嚴謹，需人為手動操作的步驟很少。可用來標記細胞器、亞細胞等結構，例如細胞膜、線粒體、線粒體和細胞核等。
Smart Cell線粒體染色試劑盒可以標記活細胞中的線粒體，使之帶綠色熒光(Ex/Em =490/520 nm)。本試劑盒使用染料為一種疏水性復合物，屬線粒體選擇性染料，該染料能輕易進入活細胞內，通過線粒體膜電位變化滲透進入線粒體，并在線粒體中富集。Smart Cell提供了標記線粒體的全套試劑，能提供藍色/綠色/紅色/橙色等不同熒光供選擇，既可單獨使用，也支持對細胞的多重熒光分析。這種高效的細胞標簽為從空間上和時間上研究發(fā)生的細胞活動提供了一種十分有效的方法。
試劑盒組分
組分 | 數量 |
Component A: MitoView Green染料 | 100 µL (500 X DMSO stock solution) |
Component B: 活細胞染色緩沖液 | 50 mL |
使用方法
1. 準備線粒體染色液
1.1 室溫避光放置5-10分鐘，預熱MitoView Green染料(Component A)。
1.2 取20µL預熱好的MitoView Green染料(Component A)，用10 mL活細胞染色緩沖液(Component B)進行稀釋。
注意：1) 20μL MitoView Green染料(Component A)足夠完成1塊96孔板實驗，剩余的MitoView Green染料(Component A) 可以根據需要分裝避光保存于-20℃，避免反復凍融。2)合適的染料濃度根據具體應用會有不同，染色條件根據細胞類型、細胞或組織的染料滲透性不同可以進行調整優(yōu)化。
2. 細胞染色
2.1 貼壁細胞：在96孔板（100μL）或培養(yǎng)皿內培養(yǎng)細胞，當細胞達到70-80%融合度，在96孔板或培養(yǎng)皿內添加等體積的染色工作液(步驟1.2)，在37°C, 5% CO2條件下培養(yǎng)細胞30分鐘-2小時。用HHBS [含20mM Hepes的Hanks緩沖液]或用自配Buffer(Hanks Buffer 與生長培養(yǎng)基按1:1)替換色染液。同FITC設置在顯微鏡下進行熒光觀察。
注意：如果細胞沒有充分染色，可以適當增加染料濃度或增加染色時間進行改善
2.2 懸浮細胞: 在1000 rpm 條件下離心細胞培養(yǎng)液5分鐘，棄去上清，用預熱好的細胞培養(yǎng)液溫和的重懸細胞，然后添加等體積的染色工作液(步驟1.2)，在37°C, 5% CO2條件下培養(yǎng)細胞30分鐘-2小時。用HHBS [含20mM Hepes的Hanks緩沖液]或用自配Buffer(Hanks Buffer 與生長培養(yǎng)基按1:1)替換色染液。同FITC設置在顯微鏡下進行熒光觀察。
圖1：HeLa 細胞用SmartCellGreen染色后進行成像分析
（所用96孔板為Costar black）
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